脈沖凝膠電泳和毛細管電泳儀有什么區別
脈沖凝膠電泳(PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一種分離大分子DNA的方法。在普通的凝膠電泳中,大的DNA分子(>10kb)移動速度接近,很難分離形成足以區分的條帶。在脈沖場凝膠電泳中,電場不斷在兩種方向(有一定夾角,而不是相反的兩個方向)變動。DNA分子帶有負電荷,會朝正極移動。相對較小的分子在電場轉換后可以較快轉變移動方向,而較大的分子在凝膠中轉向較為困難。因此小分子向前移動的速度比大分子快。脈沖場凝膠電泳可以用來分離大小從10kb到10Mb的DNA分子。毛細管電泳(capillary electrophoresis,CE)又稱高效毛細管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅動力的新型液相分離技術。毛細管電泳實際上包含電泳、色譜及其交叉內容,它使分析化學得以從微升水平......閱讀全文
脈沖凝膠電泳和毛細管電泳儀有什么區別
脈沖凝膠電泳(PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一種分離大分子DNA的方法。在普通的凝膠電泳中,大的DNA分子(>10kb)移動速度接近,很難分離形成足以區分的條帶。在脈沖場凝膠電泳中,電場不斷在兩種方向(有一定夾角,而不是相反的兩個方向)變動。DNA分子
脈沖凝膠電泳和毛細管電泳儀有什么區別
脈沖凝膠電泳(PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一種分離大分子DNA的方法。在普通的凝膠電泳中,大的DNA分子(>10kb)移動速度接近,很難分離形成足以區分的條帶。在脈沖場凝膠電泳中,電場不斷在兩種方向(有一定夾角,而不是相反的兩個方向)變動。DNA分子
毛細管凝膠電泳儀簡介
毛細管凝膠電泳儀(CGE)是20世紀80年代后期發展起來的毛細管電泳分離模式。它是將凝膠電泳儀對生物大分子的分離能力與毛細管電泳儀的快速、微量和定量分析相結合,是當今分離度極高的一種分離技術。一、工作原理:將聚丙烯酰胺等在毛細管中交聯生成凝膠,以凝膠作為載體進行電泳,凝膠具有多孔性,類似分子篩的作用
高效毛細管凝膠電泳儀簡介
?????????高效毛細管凝膠電泳儀(CGE)是20世紀80年代后期發展起來的毛細管電泳分離模式。它是將凝膠電泳儀對生物大分子的高效分離能力與毛細管電泳儀的快速、微量和定量分析相結合,是當今分離度極高的一種分離技術。一、工作原理:??????? 將聚丙烯酰胺等在毛細管中交聯生成凝膠,以凝膠作為載體
高效毛細管凝膠電泳儀簡介
? ? ? ??高效毛細管凝膠電泳儀(CGE)是20世紀80年代后期發展起來的毛細管電泳分離模式。它是將凝膠電泳儀對生物大分子的高效分離能力與毛細管電泳儀的快速、微量和定量分析相結合,是當今分離度極高的一種分離技術。一、工作原理:??????? 將聚丙烯酰胺等在毛細管中交聯生成凝膠,以凝膠作為載體進
毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較
?毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度和分配系數的差異進行分離。毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較如下:一、檢測器選擇:1、毛細管電泳儀:多2、平板凝膠電泳儀:少二、分離度:1、毛細管電泳儀:高2、平板凝膠電泳儀:低三、定量分析:1、毛細管電泳儀:與高效液
毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較
毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度和分配系數的差異進行分離。毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較如下:一、檢測器選擇:1、毛細管電泳儀:多2、平板凝膠電泳儀:少二、分離度:1、毛細管電泳儀:高2、平板凝膠電泳儀:低三、定量分析:1、毛細管電泳儀:與高效液相
毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較
毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度和分配系數的差異進行分離。毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較如下:一、檢測器選擇:1、毛細管電泳儀:多2、平板凝膠電泳儀:少二、分離度:1、毛細管電泳儀:高2、平板凝膠電泳儀:低三、定量分析:1、毛細管電泳儀:與液相色譜
毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較
毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用帶電粒子之間的淌度和分配系數的差異進行分離。毛細管電泳儀與平板凝膠電泳儀的比較如下:一、檢測器選擇:1、毛細管電泳儀:多2、平板凝膠電泳儀:少二、分離度:1、毛細管電泳儀:高2、平板凝膠電泳儀:低三、定量分析:1、毛細管電泳儀:與高效液相
毛細管柱和填充柱有什么區別
因為毛細柱細長,填充柱短,容量大。所以毛細柱飽和進樣量要比填充柱要小得多。于是在進樣的時候:填充進樣口不分流,毛細進樣口分流。填充進樣口下面結填充柱,毛細進樣口下面結毛細柱。各自有適合分析的樣品。
脈沖電場凝膠電泳的原理和作用
在標準的PFGE中,第一個脈沖的電場方向在另一側成45°夾角。由于瓊脂糖凝膠的電場方向、電流大小及作用時間都在交替變化,使得DNA分子能夠隨時調整其游動方向,以適應凝膠孔隙的無規則變化。與相對分子質量較小的DNA相比,相對分子質量較大的DNA需要更多的脈沖次數來更換其構型和方位,使其按新的方向游動。
脈沖場凝膠電泳
脈沖場凝膠電泳1)高分子量DNA瓊脂糖凝膠塊制備和加工1.收集10ml全血,加入30ml細胞裂解液。置冰浴中至少20min直至紅細胞完全溶解。2.2000r/min離心10min,移去紅色上清液,再次用細胞裂解液洗滌細胞,然后用PBS重懸細胞。3.稀釋單細胞懸液并取一小份用Neubauer腔計數細胞
毛細管電泳儀有哪些特點?
1)與紫外,激光誘導熒光和電化學檢測器相比,更是一種通用型檢測器; 2)由于質譜的選擇性和專一性,彌補了樣品遷移時間變化的不足; 3)質譜檢測的靈敏度優于紫外分光光度法; 4)質譜在檢出峰的同時還能給出分子量和結構信息; 5)某些質譜技術可以給出多電荷離子,對分析大分子如糖,蛋白質等與C
凝膠電泳儀
凝膠電泳儀通常用于分析用途,但也可以作為制備技術,在采用某些方法(如質譜(MS)、聚合酶鏈式反應(PCR)、克隆技術、DNA測序或者免疫印跡)檢測之前部分提純分子。
高效毛細管電泳儀有哪些特點
分離效率高,分析速度快,檢測靈敏度高? 試劑用量少,樣品預處理簡單? 微處理器控制,波長重復性高? 檢測范圍寬? 可變波長選擇,190~700nm連續可調? 液晶屏幕顯示,輕觸面板,程控找波長,自動調零? 獨特的氘燈溫度控制方式,氘燈使用壽命不少于2000小時? 進樣方式:電進樣 0~30KV可調
脈沖場電泳儀基本操作
電泳前半小時進行以下工作:1.檢查冷凝系統,確認管道連接密閉,不漏氣。2.在電泳槽內加入約2.2升合適的電泳液。3.接通主機和冷凝泵電源,開啟主機開關,主機自檢結束后,開啟冷凝系統開關按“set temp”鍵調節需要的電泳溫度,按“actual temp”顯示實際溫度。調節泵的速度為“100”左右。
脈沖場凝膠電泳實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材 電泳儀實驗步驟 1. ?制備用于水平電泳的1%瓊脂糖凝膠,放入電泳裝置,其上覆蓋以2~3 mm 的GTBE或TBE緩沖液。?2. ?加入液體樣品。裝好蠕動泵用于電泳緩沖液循環。3. ?對于微型凝膠調整循環速度至5~10 ml/min 對于
脈沖場凝膠電泳實驗
實驗概要了解脈沖場凝膠電泳(PFGE)的工作原理,并學習和掌握有關的操作技術。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb,在某些情況下,超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時,將會改變無規卷曲的構象,沿電場方向伸直,與電場平行從而才能通過凝膠。此時,大分子通過凝膠的方式相同,遷移率無
毛細管電泳儀毛細管電泳儀選型指南
選型指南1-最大壓力。2-制冷效果,效果液冷要好于空冷。3-緩沖盤和樣品盤的設置,哪個更符合使用需要。4-安全性。5-檢測器種類和可擴展性。總之,看你做什么樣的研究,如果只做小分子或者經費不太多,低配置就可以了。但是如果要想做大分子或者今后還可能用CE做更多方面的研究,還是高配置的電泳能給你提供更多
毛細管電泳儀毛細管電泳儀使用操作
毛細管電泳儀使用操作: 1.電極不要和毛細管接觸,樣品貯器和緩沖液貯器液面的高度應保持平衡。 2.使系統盡可能保持恒溫。因溫度直接影響粘度,而影響進樣量的恒定。 3.樣品溶液中的溶劑需要與緩沖液互溶,前者的離子強度應低于后者。 4.防止樣品溶液和緩沖液蒸發、損耗。
電泳槽與電泳儀之間有什么區別
電泳槽是凝膠電泳系統的核心部分,其系統的迅猛發展主要也是體現在電泳槽上。根據電泳的原理,凝膠都是放在兩個緩沖腔之間,電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。緩沖液和凝膠之問的接觸可以是直接的液體接觸,也可以間接通過凝膠條或濾紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場,但
脈沖場凝膠電泳的應用
脈沖場凝膠電泳在生物基因分型、分子流行病學研究、細胞凋亡、追蹤傳染源、獸醫流行病診斷輔助、食品和公共健康及染色體DNA分離等研究中有廣泛應用。追蹤傳染源脈沖場凝膠電泳用于評估同一事件中不同來源菌株可能存在的關系,是溯源的有用技術之一。當疫情爆發時, 為了采取有針對性的措施,對該疫情進行合理有效地防控
脈沖電場凝膠電泳的定義
脈沖電場凝膠電泳(pulsed-field gel electrophoresis),在脈沖電場中,DNA分子的遷移方向隨著電場方向的周期性變化而不斷改變。
脈沖[交變]電場凝膠電泳
中文名稱脈沖[交變]電場凝膠電泳英文名稱pulse [alternative] field gel electrophoresis定 義利用脈沖電場的作用在凝膠介質中分離大分子DNA的一種電泳方法。由于超過一定大小(大于40 kb)的線狀DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳的速度幾乎相同,無法在恒場強凝膠
交變脈沖電場凝膠電泳
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中,DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時,在電場作用下,迫使DNA變形擠過篩孔,而沿著泳動方向伸直,因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向,則DNA分子必須改變其構象,沿新的泳動方面伸直,而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
脈沖電場凝膠電泳的定義
PFGE:脈沖電場凝膠電泳(pulsed-field gel electrophoresis),在脈沖電場中,DNA分子的遷移方向隨著電場方向的周期性變化而不斷改變。在標準的PFGE中,第一個脈沖的電場方向在另一側成45°夾角。由于瓊脂糖凝膠的電場方向、電流大小及作用時間都在交替變化,使得DNA分子
脈沖場凝膠電泳(PFGE)概述
脈沖場凝膠電泳(PFGE)的原理大致為:細菌包埋于瓊脂塊中,用適當的內切酶在原位對整個細菌染色體進行酶切,酶切片段在特定的電泳系統中通過電場方向不斷交替變換及合適的脈沖時間等條件下而得到良好的分離。PFGE中內切酶的選用至關重要,所采用的內切酶常為寡切點酶(lowfrequencycleavager
脈沖場凝膠電泳(PFGE)概述
脈沖場凝膠電泳(PFGE)的原理大致為:細菌包埋于瓊脂塊中,用適當的內切酶在原位對整個細菌染色體進行酶切,酶切片段在特定的電泳系統中通過電場方向不斷交替變換及合適的脈沖時間等條件下而得到良好的分離。PFGE中內切酶的選用至關重要,所采用的內切酶常為寡切點酶(low frequency cle
脈沖場凝膠電泳(PFGE)實驗
實驗概要本實驗利用脈沖場凝膠電泳(PFGE)分離了大分子DNA。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb,在某些情況下,超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時,將會改變無規卷曲的構象,沿電場方向伸直,與電場平行從而才能通過凝膠。此時,大分子通過凝膠的方式相同,遷移率無差別(也稱“極
毛細管電泳儀器的研制和生產
毛細管電泳又稱高效毛細管電泳,是一類以毛細管為分離通道、高壓直流電場為驅動力的新型液相分離分析技術?(Fig.1)。自20世紀90年代以來,該技術迅速被各種標準?(包括中國藥典、國標、美國藥典,甚至是歐洲標準)?所收錄,成為現代分析科學中繼高效液相色譜之后的又一重大進展。 目前,毛細管電泳在生