關于反義RNA的基本信息介紹
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,或與靶mRNA結合形成雙鏈RNA,從而易被RNA酶Ⅲ 降解;Ⅱ類反義RNA與mRNA的非編碼區結合,引起mRNA構象變化,抑制翻譯;Ⅲ類反義RNA則直接抑制靶mRNA的翻譯。......閱讀全文
關于反義RNA的基本信息介紹
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻
關于反義RNA的來源介紹
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。
關于反義RNA的注意點的介紹
[1]長的反義RNA并不一定比短的反義RNA更為有效; [2]在原核生物中針對SD序列及其附近區域的反義RNA可能更有效; [3]在真核生物中,對應于5'端非編碼區的反義RNA可能比針對編碼區的反義RNA更有效; [4]盡量避免在反義RNA分子中出現自我互補的二級結構; [5]設
反義RNA技術介紹
隨著分子生物學和遺傳工程的發展,基因治療應運而生,反義技術是其中一種,它的基礎是根據核酸雜交原理設計針對特定靶序列的反義核酸,從而抑制特定基因的表達,包括反義RNA、反義DNA及核酶(Ribozyme),它們通過人工合成和生物合成獲得。反義DNA是指一段能與特定的DNA或RNA以堿基互補配對的方式結
反義RNA的功能介紹
在原核生物中反義RNA具有多種功能,例如調控質粒的復制及其接合轉移,抑制某些轉位因子的轉位,對某些噬菌體溶菌-溶源狀態的控制等。下文僅舉數例。調控細菌基因的表達反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白
關于反義RNA的人工合成的介紹
既然反義RNA在原核生物中對基因表達起著重要的調控作用,那么人工設計在天然狀態下不存在的反義RNA來調節靶基因的表達,想必也是可能的。這已在不少實驗中得到證實。 1.由于對靶mRNA的SD序列的上游區的結構了解甚少,因此,在要設計Ⅱ類反義RNA用于和靶mRNASD序列上游區結合,以期達到調節該
反義RNA的定義
反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子,也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合, 即抑制了該mRNA的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式,最早是在E.coli 的產腸桿菌素的Col E1質粒中
反義RNA的來源
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。
反義RNA的功能
在原核生物中反義RNA具有多種功能,例如調控質粒的復制及其接合轉移,抑制某些轉位因子的轉位,對某些噬菌體溶菌-溶源狀態的控制等。下文僅舉數例。調控細菌基因的表達反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白
反義RNA的定義
反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子,也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合, 即抑制了該mRNA的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式,最早是在E.coli 的產腸桿菌素的Col E1質粒中
反義RNA的來源
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。
反義RNA技術改良
用反義RNA分子來調節基因表達時,經常會遇到的困難是反應模板的穩定性差。因此,人們正在探索如何改進反義基因的新方法,目前主要有:(1)優化反義RNA的結合。反義RNA鏈的長度對抑制基因的效果是重要的。雙螺旋形成過程中將釋放能量,RNA鏈越長,釋放的自由能越多。從這一意義來講,可以說長RNA作為反義R
概述反義RNA技術
隨著分子生物學和遺傳工程的發展,基因治療應運而生,反義技術是其中一種,它的基礎是根據核酸雜交原理設計針對特定靶序列的反義核酸,從而抑制特定基因的表達,包括反義RNA、反義DNA及核酶(Ribozyme),它們通過人工合成和生物合成獲得。 反義DNA是指一段能與特定的DNA或RNA以堿基互補配對
反義RNA技術要素
[1]長的反義RNA并不一定比短的反義RNA更為有效;[2]在原核生物中針對SD序列及其附近區域的反義RNA可能更有效;[3]在真核生物中,對應于5'端非編碼區的反義RNA可能比針對編碼區的反義RNA更有效;[4]盡量避免在反義RNA分子中出現自我互補的二級結構;[5]設計的反義RNA分子中
反義RNA穩定方法
[1]反義RNA3'端帶有莖環結構或類似ρ-不依賴性終止子結構時,可以穩定RNA分子;[2]Gorski等還發現在T4噬菌體的基因32mRNA的5'端上游的莖環結構及其附近的序列亦可穩定RNA分子。所以在設計反義RNA基因時,最好將產生3'及5'端這種二級結構的序列克
什么是反義RNA?
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,
簡述反義RNA的定義
反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子,也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合, 即抑制了該mRNA的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式,最早是在E.coli 的產腸桿菌素的Col E1質
反義RNA的制備實驗
RNA 也可以由線狀 DNA 為模板,通過 RNA 聚合酶(如T3、T7 或 SP6 ) 在體外合成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗材料限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽
反義RNA的作用機制
反義RNA的分類和作用機制:下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源轉錄后水平?micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-溶源?噬菌體sa
反義RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解 模板 DNA 大腸桿菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 試劑、試劑盒
反義RNA的來源途徑
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。
反義RNA的制備實驗
實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽酸亞精胺NaCl胎盤RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC儀器、耗材 DNA合成儀瓊脂糖凝膠電泳微量離心管實驗步驟 一、化學合成的 RN
反義技術——RNA干擾(RNA-interference,RNAi)
最近由于RNA干擾(RNA interference,RNAi)的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的(1),是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步,已經有許多這方面的綜述發表(2-4)。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
反義RNA的人工合成過程介紹
既然反義RNA在原核生物中對基因表達起著重要的調控作用,那么人工設計在天然狀態下不存在的反義RNA來調節靶基因的表達,想必也是可能的。這已在不少實驗中得到證實。1.由于對靶mRNA的SD序列的上游區的結構了解甚少,因此,在要設計Ⅱ類反義RNA用于和靶mRNASD序列上游區結合,以期達到調節該mRNA
反義RNA調控細菌基因的表達功能介紹
反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白的主要成分這一。micF RNA是從另一基因(ompC基因)附近的DNA序列轉錄而來,和o-mpFn RNA的5'端有70%的序列互補,因此在體外m
細胞化學詞匯反義RNA
中文名稱:反義RNA外文名稱:antisense RNA概????念:與mRNA互補的RNA分子作????用:抑制mRNA的翻譯分????類:三類反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導
簡述反義RNA的穩定方法
[1]反義RNA3'端帶有莖環結構或類似ρ-不依賴性終止子結構時,可以穩定RNA分子; [2]Gorski等還發現在T4噬菌體的基因32mRNA的5'端上游的莖環結構及其附近的序列亦可穩定RNA分子。所以在設計反義RNA基因時,最好將產生3'及5'端這種二級結構
反義RNA技術的注意要點
[1]長的反義RNA并不一定比短的反義RNA更為有效;[2]在原核生物中針對SD序列及其附近區域的反義RNA可能更有效;[3]在真核生物中,對應于5'端非編碼區的反義RNA可能比針對編碼區的反義RNA更有效;[4]盡量避免在反義RNA分子中出現自我互補的二級結構;[5]設計的反義RNA分子中
概述反義RNA的作用機制
反義RNA的分類和作用機制:下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。 調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源 轉錄后水平 micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體 oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-
反義RNA的概念和分類
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,