關于胚胎干細胞的研究進展—倉鼠ES細胞的介紹
Doetschman等從敘利亞金黃倉鼠（mesocricetus auratus）囊胚建立了4個ES細胞系，都具有正常的核型和44條染色體，1個為XX型，3個為XY型，它們能夠在PMEF（primarymouse embryonic fibroblast）飼養層上增殖并保持未分化狀態，懸浮培養時，能形成包含胚胎外胚層組織和心肌組織的類胚體，但未證實倉鼠ES細胞是否能夠參與形成生殖系嵌合體。倉鼠是第二個繼小鼠之后建立ES細胞系的哺乳動物。......閱讀全文
ES細胞分化培養實驗——培養皿ES細胞集落
實驗材料ES 細胞單一胚胎樣體儀器、耗材細菌培養皿ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：懸滴培養的 ES 細胞單一胚胎樣體100 mm 細菌培養皿ES 分化培養基2. 在 100 mm 細菌培養皿中加 10 ml 預熱的分化培養基。3. 從溫箱中取出培養 2 天的懸滴培養物。小心翻轉培養
將基因轉移至未分化ES細胞實驗——ES細胞電穿孔
實驗材料線性化轉移基因 DNA未分化 ES 細胞儀器、耗材電穿孔儀和電穿孔杯neoR-MEF 滋養板ES 生長培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：線性化轉移基因 DNA（1 mg/ml，溶于無菌 TE）未分化 ES 細胞Bio-Rad 電穿孔儀和電穿孔杯100 mm neoR-MEF 滋養板ES
ES細胞分化培養實驗
實驗材料單一胚胎樣體儀器、耗材組織培養板巴斯德吸管玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：培養懸液中的單一胚胎樣體6 孔組織培養板帶棉塞巴斯德吸管明膠包被的玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基2. 準備明膠包被的玻璃蓋玻片3. 用無菌鑷子在 6 孔組織培養板的每孔中放一塊明
ES細胞分化培養實驗
實驗材料 未分化 ES 細胞試劑、試劑盒 PBS儀器、耗材 ES 分化培養基移液器實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料：未分化 ES 細胞無 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 分化培養基8 道微量移液器無菌多道移液器容器2. 收獲未分化 ES 細胞。3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml
ES細胞分化培養實驗
懸滴培養 培養皿ES細胞集落 附著ES細胞分化培養 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 未分化 ES 細胞
ES細胞打靶技術介紹
你聽說過喀邁拉獸（chimera）嗎？沒錯，就是古希臘神話故事中一只會噴火的怪獸，這種怪獸擁有獅頭、羊身、蛇尾，像是由幾種動物拼成的。或許你知道喀邁拉獸，但你是否知道在生物遺傳學中也有一種名為喀邁拉的動物嗎？那這神奇的怪獸與我們生物領域中的ES細胞基因打靶到底有什么關系呢？本期話題，咱們就一起來聊聊
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
試劑、試劑盒 PBS胰酶溶液 儀器、耗材 MEF 滋養板巴斯德吸管ES 生長培養基 實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料： 60 mm MEF 滋養板（接種不能超過 7 天） 帶棉塞無菌巴斯德吸管 無 Ca2+?和 Mg2+?PBS ES 生長培養基 胰酶
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 胰酶溶液 儀器、耗材 MEF 滋養板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 胰酶溶液 儀器、耗材 MEF 滋養板 巴斯德吸管 ES 生
大鼠ES細胞的實驗相關介紹
IannacconePM等從大鼠PVG近交系分離克隆大鼠ES細胞系-RESC-01，該細胞系對SSEA-1和AKP呈陽性，在大鼠胎兒成纖維細胞飼養層上能很好的增殖，在體內環境能分化形成多種細胞類型。RESC-01細胞系在體外懸浮培養時形成的胚體出現有節律的收縮運動，將其注入囊胚并移植假孕母鼠能生
ES細胞的主要用途
（1）可用于研究哺乳動物個體發生和發育的規律，也是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。（2）ES細胞通過誘導分化可產生新的組織細胞，用于治療人類的組織損傷和某些頑癥。（3）可通過ES細胞的體外誘導分化，定向培育人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和移植后免疫排斥的問題。
牛ES細胞的分離培養相關介紹
Saito等在加有LIF的培養基中對牛ICM進行培養，分離得到牛ES細胞并進行傳代。Sims等使用與一般ES細胞分離完全不同的低密度培養法，使用BRL(buffaloratliver)條件培養基并添加亞硒酸鈉、胰島素、運鐵蛋白和50mL/L胎牛血清，培養6d～10d，得到15個ES細胞系，將其作
小鼠ES細胞的分離方法的介紹
小鼠ES細胞的分離方法基本成熟，且已廣泛應用于生命科學研究的各個領域。1981年Evans首次分離得到小鼠ES細胞，他以手術切除受精后2.5d小鼠卵巢并結合激素注射干擾子宮環境，從而使胚胎延遲著床，再回收胚胎，將其體外培養于STO細胞飼養層上，結果得到了小鼠ES細胞系。MartinGR以免疫外科
ES細胞分化培養實驗——懸滴培養
實驗材料未分化 ES 細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材ES 分化培養基移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：未分化 ES 細胞無 Ca2+?和 Mg2+?PBSES 分化培養基8 道微量移液器無菌多道移液器容器2. 收獲未分化 ES 細胞。3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml PBS
將基因轉移至未分化ES細胞實驗—將ES克隆挑取到96孔板
儀器、耗材ES 生長培養基neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板無菌吸頭微量移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：ES 生長培養基，含 300 μg/ml G418 和青霉素/鏈霉素96 孔平底 neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板細而圓的無菌吸頭微量移液器（10~100 μl）8 道移
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ?
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 試劑、試劑盒 DMSOPBS胰酶溶液凍存液 儀器、耗材 平底 96 孔板移液器ES 生長培養基ES 分化培養基 實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料： DMSO（組織培養級） 平底 96 孔板 多道移液器 無菌多道
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
關于小鼠ES細胞的基本信息介紹
小鼠ES細胞的分離方法基本成熟，且已廣泛應用于生命科學研究的各個領域。1981年Evans首次分離得到小鼠ES細胞，他以手術切除受精后2.5 d小鼠卵巢并結合激素注射干擾子宮環境，從而使胚胎延遲著床，再回收胚胎，將其體外培養于STO細胞飼養層上，結果得到了小鼠ES細胞系。 Martin G R
Electroporation－of－ES－cells
Cells are routinely passaged two days prior to electroporating. Usually one 10 cm plate at approximately 80% confluency will provide enough cells for
KARYOTYPING－ES－CELLS
An actively growing culture of cells is required, i e 2 - 3 d ES cell culture. The total number of cells needs to be between 106 - 107 cells.N B Read
日本用ES細胞制成“精子干細胞”：或解不孕難題
日本京都大學教授齋藤通紀的研究小組在6日的美國科學雜志網絡版上發表一項成果：首次在老鼠試驗中，由能夠成為各種細胞或組織的“胚胎干細胞”（ES細胞）成功在體外制作出了成為精子基礎的“精子干細胞”。 報道稱，研究小組還確認從該“精子干細胞”產生了精子。據悉，該成果有助于弄清精子的形成機理，促進探明
Human－Embryonic－Stem－(ES)－Cell－Protocols——Freezing－Human－ES－Cells
?Collagenase cells for approximately 7 minutes at 37 °C (until edges of colonies are curling up).With a 5 ml pipet, gently pipet and scrape colonies f
Human－Embryonic－Stem－(ES)－Cell－Protocols——Thawing－Human－ES－cells
Remove Human ES cells from liquid nitrogen storage tank. Fill out a freeze/thaw form.Thaw cryovial by gently swirling in waterbath until only a small
Human－Embryonic－Stem－(ES)－Cell－Protocols——General－notes－on－ES－cell－culture
hES media has a two week shelf life. hES cells should be cultured in 4, 6, 24, 48, 96 well plates. Growing cells in flasks is not recommended be
Human－Embryonic－Stem－(ES)－Cell－Protocols—Splitting－Human－ES－cells－onMatrige
based on splitting onto on plateWarm collagenase media to 37°C in a water bath.Aspirate media off of cell culture plate.Add the following amount of co
Human－Embryonic－Stem－(ES)－Cell－Protocols——Splitting－Human－ES－cells－on－MEFs
based on splitting onto one plateWarm collagenase IV split media to 37 °C in a water bath.Aspirate media off of cell culture plate.Add the following a
Counting－ES－cell－Chromosomes
(original reference: "tissue culture made easy" by Christian LaMantia from the Magnuson lab) 1) Plate cells onto gelatinized plates (35 or 60 mm) wi
Routine－Culturing－of－ES－Cells
Cell are normally passaged every 2-3 days, this is important to avoid differentiation.Signs of differentiation are:-i) colonies are surrounded by flat
ES－Cell－Culture－and－Manipulation
MediaHigh glucose DMEM (-pyruvate, -glutamine)20% Heat-inactivated Fetal calf serum (can vary by cell type, be sure!!)1X l-glutamine1X Penicillin/stre