癌癥生長調控因子的篩選 這篇論文報告了在一個完好的哺乳動物生理系統(小鼠皮膚)中所完成的首次全基因組活體 “RNA干涉”(RNAi)篩選。以前在哺乳動物細胞中進行的RNAi掃描都限于培養的細胞。作者將在胚胎表皮正常生長中所涉及的基因與由Hras致癌基因驅動的異常細胞增殖所必需的基因進行了比較。他們所獲得的值得注意的發現包括β-catenin在正常細胞生長中所起的一個負面作用,這與在由致癌基因驅動的生長中需要β-catenin形成對比。從這次篩選中所產生的表皮生長潛在生理調控因子的列表,為未來研究提供了一個豐富資源,也為皮膚癌治療提供了可能的目標。 來自凝聚態物質的受激X射線發射 “共振非彈性X射線散射”等方法,是研究材料的基礎性電子和振動激發的強大工具,但需要非常高的光子密度來提取相對較弱的有用信號;所需光子密度是如此之高,以至于會損害樣品。現在,Martin Beye及同事介紹了利用X射線自由電子......閱讀全文
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統,由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷,人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來,基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行,在技術方法上得到了很大發展,時至今
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞
一直以來,科學家們在研究某個基因的功能時無非就只有兩種方法,要么就是敲除這個基因,或者下調其表達量,要么就是提高其表達量。在20世紀90年代發現的RNA干擾技術又給科學家們提供了一條新的研究基因功能的途徑,RNA干擾技術可以通過小RNA分子(small RNA molecule)與目標m
TCR/CD3復合物與配體結合后,經多種信號轉導途徑傳遞信號,最終導致T細胞活化和增殖。信號轉導中所涉及的基因根據其活化時間可以分為早早期、早期、晚期基因三種類型(表8-5)。早早期基因的轉錄不需蛋白的合成,而早期及晚期基因的轉錄則需蛋白的合成。早早期及早期基因轉錄在有絲分裂期之前,而
2.癌基因的激活癌基因可以通過多種方式被激活而過度表達。 (1)突變激活:體細胞內的原癌基因可以因點突變而成為癌基因,產生異常的基因產物;也可由于點突變使基因擺脫正常的調控而過度表達。因此,突變激活又稱為激活的質變模式(qualitative model)。例如在
基因敲除可以說是基因組 學、細胞分離培養以及轉基因技術的組合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做個小結,以供大家學習。一.概述:基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子 生物學技術,是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用D
不用創建一個胚胎,而將成體細胞還原為胚胎狀態是一件棘手的事情。科學家們現已能重置一個成熟體細胞中的DNA,使該細胞能成長為人體內的任何細胞類型,如心臟肌肉細胞、神經細胞和膀胱細胞等。 一個病人到醫院診斷病情,醫生告知其診斷結果不太好,必須進行手術治療。 于是,醫生從病人的頭上拔出一根
基因編輯技術是對某一核苷酸序列中的特定基因位點進行人為改變,插入、刪除、替換或修飾基因組中的特定目的基因使其表達性狀改變的一種新興分子生物技術。CRISPR -Cas9作為一種新興的基因編輯技術,通過定向敲除腫瘤免疫檢查點分子或者通過快速簡便的基因編輯,而被廣泛應用于腫瘤治療領域,其顯著降低了腫
五、親代桿狀病毒基因組的改進就像轉移質粒的改進,對親代桿狀病毒基因組的改進也是為了滿足各種不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重組桿狀病毒載體構建和分離低效率的方法,這也是最初的桿狀病毒-昆蟲細胞系統存在的主要問題。現在已經知道這個問題的根源在于, 在共轉染的昆蟲細胞系中,轉移質粒和親代桿狀病毒
在雙鏈 DNA 分子中,只有一條鏈轉錄成 mRNA,這條鏈稱為有意義鏈(sense strand),該基因的另一條鏈則稱反意義鏈(antisense strand)。在含有許多基因的 DNA 雙鏈中,每個基因的有意義鏈并不是在同一條 DNA 鏈上。也就是說,一條鏈上既具有某些基因的有意義鏈,
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞死亡
外源基因在原核細胞中表達是基因工程操作中最初取得成功的途徑。1 原核生物基因表達的特點同所有的生命過程一樣,外源基因在原核細胞中的表達包括兩個主要過程:即 DNA轉錄成mRNA和 mRNA翻譯成蛋白質。與真核細胞相比,原核細胞的表達有以下特點:①原核生物只有一種RNA 聚合酶(真核細胞有三種)識別原
蛋白質性質是由DNA分子上堿基數量和順序決定的。如果DNA分子的堿基數量或順序發生變化,由它編碼的蛋白質結構就發生相應的改變。由于基因突變導致蛋白質分子質和量異常,從而引起機體功能障礙的一類疾病稱為分子病(molecular disease)。 分子病種類很多,根據各種蛋
“黑匣子”(Black Box),學名是飛行數據記錄儀,是飛機專用的電子記錄設備之一,可以記錄飛機飛行期間的詳細信息資料。 回首2014年,找不到“黑匣子”的馬航(MAS)在12月15日告別吉隆坡股票交易所,結束為期29年的上市生涯。這一天,恰好也是韓國科學家黃禹錫的生日。 看到上述開頭,你
腺病毒載體的優點:1. 宿主范圍廣, 對人致病性低腺病毒載體系統可廣泛用于人類及非人類蛋白的表達。腺病毒可感染一系列哺乳動物細胞,因此在大多哺乳動物細胞和組織中均可用來表達重組蛋白。特別需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮細胞性,而人類的大多數的腫瘤就是上皮細胞來源的。另外,腺病毒的復制基因和致病基因均已
用基因工程方法將bcl-2基因這種細胞凋亡抑制基因導入細胞,成為眾多研究者的選擇。bcl-2基因的過量表達能抑制Gln或氧缺乏引起的細胞凋亡,減少細胞特定營養成分的消耗,提高細胞密度和目的蛋白產量,這對于細胞大規模培養具有重大意義。對細胞的這種保護作用依賴于bcl-2等抑制基因的高水平表達。因此,需
蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。 1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性
一、體細胞突變 腫瘤可以看作是在個體遺傳素質的基礎上,尤其是在個體對腫瘤的遺傳易感性基礎上,致癌因子引起細胞遺傳物質結構或功能異常的結果。這種異常大多數不是由生殖細胞遺傳得來,而是在體細胞中新發生的基因突變所致。發生突變的癌前細胞在一些促癌因素的作用下發展為腫瘤。因此,有
活體動物體內光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進
【探針技術用于檢測由siRNA介導的基因調制】 為了研究基因功能,科學家們常常會有針對性地關斷某些特定的基因。 而要驗證這種基因沉默的有效性, 就需要運用適當的具特異性的檢測方法。理想的檢測方法不僅要測量準確, 而且還要能讓細胞保持完好無損。 利用諸如RNA(核
專題一:RNA干擾技術(RNAi)1995年,康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現,反義和正義RNA都阻斷了基因的表達,他們對這個結果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究證明,在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中,真正起作用的是雙鏈RNA。這些
蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同,適合表
蛋白質組(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一個基因組,或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。 蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別,它隨著組織、甚至環境狀態的不同而改變。 在轉錄時,一個基因可以多種mRNA形式剪接,一個蛋白質組不是一個基因組的直接產物,蛋白質組中蛋
(3)CHO細胞穩定表達系統:動物細胞瞬時表達系統中外源基因沒有穩定地整合到宿主細胞染色體中,一染色體外DNA的形式存在。因而只能瞬時表達。要使外源基因在宿主細胞中高效、穩定地表達,必須建立一個穩定表達系統,包括適宜的表達載體、有效的基因轉染、標記基因和目標基因的選擇與共擴增、受體適當的受體細胞和培
組蛋白(Histone)在真核生物染色體中扮演著重要的角色,是染色體結構單元核小體的重要組成部分。由核心組蛋白H3,H4,H2A,H2B形成的八聚體是DNA纏繞的主要承載體【1】。除了用以裝配染色體外,組蛋白的另外一個重要功能是參與基因組信息的表達調控。組蛋白氨基酸殘基上的翻譯后修飾如乙酰化、甲
最近,研究人員通過對各種綠藻進行基因組測序,已經接近于解開了“引起多細胞生物的遺傳變化”的謎團。 從單細胞生物到多細胞生物的過渡,是地球上生命進化的關鍵進步;在不同的系統發育譜系中,這種改變已經獨立地發生了多次。了解“有多少基因以及有哪些基因,對單細胞祖先成為多細胞來說是必要的”,是一個有趣的
自CAR-T療法在2017年首次獲批以來,這一突破性療法的臨床前和臨床期開發出現了爆發式的增長。去年的ASH年會上,楊森(Janssen)/南京傳奇、百時美施貴寶(BMS)、吉利德科學/Kite Pharma、和諸多中國生物醫藥公司開發的CAR-T療法亮出令人驚艷的數據。今年,更可能有2款以上C
第七節 實驗動物的處死當實驗中途停止或結束時,實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物,原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。一、蛙 類常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的