分離植物總RNA
實驗概要認識真核生物RNA的組成及分離的原理；學習RNA提取過程中抑制RNA酶活性的方法。實驗原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一個典型的真核細胞約含有10-5~10-6mg的RNA，其中80-85%為rRNA，其余15-20%主要由各種低分子量RNA組成（如tRNA、核內小分子RNA等），細胞的RNA大多都與蛋白質結合在一起，但這種結合很容易在變性劑存在下打破。在經有機溶劑抽提后，用乙醇或異丙醇可將其從上清中沉淀出來。RNA提取中要嚴格避免RNA酶的污染，因為RNA酶極穩定，通常的消毒方法難以將其滅活，而空氣中細菌、真菌和操作者都有可能成為RNA酶的污染源。RNA酶污染會使分離的RNA大量降解。對于rRNA和tRNA分子具有確定的大小和核苷酸序列，當總RNA分離出來后還能用電泳、密度梯度離心、層析等方法加以進一步分離純化。而mRNA的分離將在后續實驗中做到。主要試劑1. 異硫氰酸胍2. CSB（檸檬酸/十二......閱讀全文
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可從各種樣品中提取 RNA，且產量和質量非常穩定。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材轉子-定子均化器或類似設備Marligen Rap
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 β-巰基乙醇 儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Ra
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
試劑、試劑盒 乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Rapid Total RNA System實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑乙醇,70%和100%β-巰基乙醇2.特殊設備轉子-定子均化器或類似設備3.其他Marligen Rapid Total RNA
總RNA的提取
?完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地將ＲＮ
分離純化總RNA
1）??????用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取純化組織和細胞中的RNA1.??????選取從組織細胞或細胞中提取RNA的適宜方法組織a.???????分離組織并立即置于液氮中。b.??????將約100 mg冰凍組織含液氮的研缽中，用研棒研磨。研磨過程中可加入液氮使組織保持冰凍狀態。c.???????
總RNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒，可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑，異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇，加上整個操作都在冰浴下進行，這樣就能顯著降低RNA 的
分離植物總RNA
實驗概要認識真核生物RNA的組成及分離的原理；學習RNA提取過程中抑制RNA酶活性的方法。實驗原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一個典型的真核細胞約含有10-5~10-6mg的RNA，其中80-85%為rRNA，其余15-20%主要由各種低分子量RNA組成（如tRNA、核內小分子
總RNA的提取
完整RNA 的提取和純化，是進行RNA 方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA 分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
總RNA提取實驗
實驗方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸鈉的聯合使用，將促使核蛋白復合體的解離，使RNA 與蛋白質分離，并將RNA 釋放到溶液中。而進一步從復合體中純化RNA ，則根據Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法進行，采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚將使RNA 進入水相
小麥總RNA的提取
實驗概要從黃化小麥苗中提取總RNA，可以為cDNA文庫的構建做好準備。實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃
細胞總RNA的提取
提取細胞RNA的步驟：1)??六孔板每孔細胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，槍頭吹打。2)??將各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振搖15s。15－30℃下孵育2-3min，離心（4℃，12，000g，15min）。3)??離心后液體分為三層（上層－無色
酵母總RNA的制備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 ? 苯酚 10%SDS ?酚 ?氯仿 ? 無水乙醇 乙醇. ?3mol L 乙酸鈉 ?無 RNase
真菌總－RNA－的制備
真菌總 RNA 的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇 ?12mol L 氯化鋰
酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 無水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸鈉 無 RNase 的水儀器、耗材 髙速離心機實驗步驟 一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)
真菌總－RNA－的制備
試劑、試劑盒 酚氯仿異戊醇 12mol L 氯化鋰 3mol L 乙酸鈉 乙醇 DEPC 處理的水儀器、耗材 水浴 低溫高速離心機實驗步驟 一 材料與設備1) 酚：氯仿：異戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：異戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化鋰。4)3mol/L 乙酸鈉。5)70% 乙醇。
小麥總RNA的提取
實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉入已準備好的離心管中，劇烈震蕩。
植物總RNA的分離
實驗概要認識真核生物RNA的組成及分離的原理；學習RNA提取過程中抑制RNA酶活性的方法。實驗原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一個典型的真核細胞約含有10-5~10-6mg的RNA，其中80-85%為rRNA，其余15-20%主要由各種低分子量RNA組成（如tRNA、核內小分子
總RNA提取實驗步驟
一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?（1）發酵3~4天（或對數生長期）的菌體，離心收集菌絲體（動植物材料無需此步處理）。?（2）用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次，并盡量除去殘存的水。?（3）加液氮充分研磨，使其成為粉末，以釋放RNA。?（4）研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。
樣品總RNA的提取
實驗概要本實驗介紹了樣品總RNA的提取方法。完整RNA的提取和純化，是進行RNA方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點，即：樣品細胞或組織的有效破碎；有效地使核蛋白復合體變性；對內源RNA酶的
總RNA提取（Trizol提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml
純化RNA實驗——從組織中純化總RNA
實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織，直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均勻，冰浴 15 分鐘
多糖多酚植物總RNA快速提取試劑提取水稻胚乳總RNA
實驗概要采用TAKARA的試劑提取水稻胚乳，主要是后期的胚乳RNA量偏少，不易提取！實驗步驟1. 稱量100mg的新鮮或者超低溫凍結的植物RNA提取樣品，迅速轉移至用液氮預冷的研缽中，用研杵研磨組織，其間不斷加入液氮，直至研磨成粉末狀。2. 向研缽中加入1000μL RNAiso-mate for
植物總RNA的提取規程
一、實驗目的掌握植物總RNA提取的原理和方法二、實驗原理RNA的提取：破壞細胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去鹽離子。RNase是一類生物活性極其穩定的酶類，能耐高溫、耐酸、耐堿，高壓滅菌處理也不能使其完全失活。在提取RNA實驗中，要盡量抑制RNase的活性。?DEPC（焦磷酸二乙酯）是很強的RNas
2.6－真菌總－RNA－的制備
試劑、試劑盒酚氯仿異戊醇 12mol L 氯化鋰3mol L 乙酸鈉乙醇DEPC 處理的水儀器、耗材水浴低溫高速離心機實驗步驟一 材料與設備1) 酚：氯仿：異戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：異戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化鋰。4)3mol/L 乙酸鈉。5)70% 乙醇。6)DEPC
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
2.5.1－酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒AE 緩沖液。 苯酚10%SDS酚氯仿 無水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸鈉無 RNase 的水儀器、耗材髙速離心機實驗步驟一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)10%SDS4)
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
小麥總RNA的提取方法
實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉入已準備好的離心管中，劇烈震蕩。
總RNA分離純化標準操作
實驗概要本實驗介紹了總RNA分離純化標準操作規程(SOP)。實驗原理氯仿是分子量比較大的有機溶劑，在提取RNA時，氯仿可以有效的使有機相和無機相迅速分離。DNA提取過程有機相中主要是酚和蛋白結合，從而使得蛋白和DNA脫離，DNA進入水相。但是在RNA的提取過程就要避免蛋白和DNA脫離，否則DNA會釋
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN