很多老師在設計科研實驗的時候都會很迷茫,到底用什么細胞好? 越來越多的老師開始傾向于原代細胞的科研實驗,在設計實驗中,原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢?原代細胞的定義:原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。但實際上,我們通常把第1代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞因為可以模擬機體的功能,主要用于:生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究下面我們整理了一些培養原代細胞的小知識:解凍原代細胞對解凍過程非常敏感,因此將小瓶置于37℃水浴鍋中,保持并輕輕旋轉直到內容物剛剛解凍是很重要的。然后應立即從水浴中取出小瓶,并轉移到無菌操作臺。確保您的培養瓶在解凍前已經準備就緒,以便可以立即用于接種細胞,并置于培養箱中,我們在使用cell systems的原代視網膜內皮細胞時,......閱讀全文
1、體積、電導和激光散射原理這是Beckman-Coulter 公司生產的血液分析儀所采用的經典分析方法,他集三種物理學檢測技術于一體,在細胞處于自然原始的狀態下對其進行多參數分析。該方法也稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法。此技術采用在標本中首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞,然后加入穩定劑來中
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或
實驗方法原理1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單
實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤
淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨
過繼性細胞免疫治療是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟, 已在多種實體瘤和血液腫瘤的臨床治療中取得較好療效。 摘要: 過繼性細胞免疫治療(adoptive cellular immunotherapy, ACI)是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟,
六、Caspase-3活性的檢測 Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關鍵的執行分子,它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個
實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于
一、 實驗準備1. 標本制備:2. zui小化非特異性結合: 二、凋亡1.凋亡的檢測方法:網站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、細胞因子1.激活的細胞因子2.CBA 四、血小板
第四節 合成細胞培養基合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。它有一定的配方,是一種理想的培養基。目前合成培養基多達10多余種,有的培養基仍在不斷進行改良。早期組織培養是利用天然培養基,目前合成培養基已經成為一種標準化的商品,從zui初的基本培養基發展到無血清培
5637細胞| 5637細胞系 培養步驟 產品名稱:5637細胞 中文名稱:人膀胱癌細胞;5637 規格:T25 供應商:上海慧穎生物科技有限公司 復蘇周期:10個工作日左右 培養步驟: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖
第一節 免疫細胞的分離 一、外周血單個核細胞的分離 將2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液與1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液混合,其比重為1.077±0.002,可作為常規的淋巴細胞分離液,即Ficoll分離液。 主要用于分離外周血中單個核細胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
1、什么是細胞治療? 細胞治療是指將正常或生物工程改造過的人體細胞移植或輸入患者體內,新輸入的細胞可以替代受損細胞、或者具有更強的免疫殺傷功能,從而達到治療疾病的目的。細胞治療在治療癌癥、血液病、心血管病、糖尿病、老年癡呆癥等方面顯示出越來越高的應用價值。一般來講,細胞治療包括腫瘤細胞免疫治療
小編:天地悠悠過客匆匆潮起又潮落~~~ 小鼠甲:咳咳,咱們是個嚴肅的科普節目…… 小編:天地洪荒,宇宙萬物,生命起源,又到了萬物~~~ 小鼠乙:(咆哮體)現在是冬天!冬天!咱們幾(今)天要講的是細胞!細胞! 小編:呃(⊙o⊙)… 好吧,咱們今天要講的是細胞(*^▽^*),
第一節 概念這里想明確兩個概念,一個是Transwell,另一個是腫瘤細胞侵襲模型。1. Transwell關于Transwell這個詞該如何解釋,查了很多資料也未見準確的注解,我覺得可以這么理解吧,trans-這個詞根有轉移、轉運、穿過等意思,well有小室的意思,可以從字面上理解,這是一類有通透
2018年即將過去,年末為大家獻上生物谷本年度糖尿病專題盤點,希望讀者朋友們能夠喜歡。1. Nature:利用細胞替換療法治療1型糖尿病取得重大進展!胞外基質組分決定著胰腺祖細胞的命運DOI: 10.1038/s41586-018-0762-2 I型糖尿病是一種自身免疫性疾病,它會破壞胰腺中產
CAR-T療法在惡性血液腫瘤中展現出的強大實力,使其逐漸成為近年來最有前景的腫瘤免疫療法,然而血液腫瘤(非實體瘤)僅僅是眾多癌癥中較小的一部分,如2019年最新的全球癌癥數據指出:約90%的癌癥發病率都是由實體瘤引起,但關于實體瘤的細胞治療臨床試驗卻很少。 如下圖所示:2019年發表在Na
CAR-T療法在惡性血液腫瘤中展現出的強大實力,使其逐漸成為近年來最有前景的腫瘤免疫療法,然而血液腫瘤(非實體瘤)僅僅是眾多癌癥中較小的一部分,如2019年最新的全球癌癥數據指出:約90%的癌癥發病率都是由實體瘤引起,但關于實體瘤的細胞治療臨床試驗卻很少。 如下圖所示:2019年發表在
用體外或體內試驗對機體的各種參與免疫應答的細胞進行鑒定、計數和功能測定,藉以了解機體的免疫狀態,并對某些臨床疾病的診斷,預后及療效觀察等也具有一定意義。一、免疫細胞的分離體外測定免疫細胞首先要從外周血或淋巴組織中分離所需的細胞。其主要方法是根據細胞的表面標記、理化性狀及功能等方面的差別進行設計。
用體外或體內試驗對機體的各種參與免疫應答的細胞進行鑒定、計數和功能測定,藉以了解機體的免疫狀態,并對某些臨床疾病的診斷,預后及療效觀察等也具有一定意義。 一、免疫細胞的分離 體外測定免疫細胞首先要從外周血或淋巴組織中分離所需的細胞。其主要方法是根據細胞的表面標記、理化
白血病免疫學第一節 白血病細胞的抗原及相應抗體白血病細胞的免疫學檢查主要是檢測白血病細胞的免疫表型。即用特異的抗體檢測白細胞的核、漿或膜上的抗原。是MIC分類中不可缺少的一部分。白血病細胞的抗原可以分為兩類:一類是正常細胞系所具有的抗原,它在正常細胞分化發育
抗體藥物是目前生物技術藥物研究中最為活躍的領域,特別是在腫瘤和自身免疫性疾病等方面的臨床應用,更是大放異彩。隨著臨床需求的增加,單克隆抗體藥物發展迅速,FDA已批準的抗體藥物多達70多個,抗體藥物銷售量年增長率基本在10%以上,大大高于制藥行業平均水平,其市場規模已經達到千億美元。 我國針對單
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7~8d小鼠的生殖細胞懸液;用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%;平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞;精原細胞主要分布
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
本期為大家帶來的是發育生物學領域的最新研究進展,希望讀者朋友們能夠喜歡。 1. Eur Respir J:新研究揭示肺臟發育高清圖譜 DOI: 10.1183/13993003.00746-2019 過早出生的嬰兒常常患有肺部發育不良,并可能面臨危及生命的后果。為了給這些嬰兒提供新穎的治療
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電信號,經數字轉換器進行數
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電