實驗概要1. 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和實驗技術 2. 掌握原位雜交技術的操作方法及熒光顯微鏡的使用方法 3. 了解其在生物學、醫學領域的應用實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代初期在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究等許多領域。FISH的基本原理是用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行特異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以將探針直接與染色體進行雜交從而將特定的基因在染色體上定位。與傳統的放射性標記原位雜交相比,熒光原位雜交具......閱讀全文
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
實驗材料核苷酸試劑、試劑盒冰水8-羥基喹啉秋水仙素固定劑酶解緩沖液儀器、耗材載玻片玻璃蓋玻片解剖針及鑷子實驗步驟原位雜交的基本操作方法(圖 14 .2 ) 演化自 Southern 雜交:標底是玻片上的染色體和細胞核,探針是帶標記的待測 DNA 序列 [ 本書中即是轉基因和對照,圖 14.3(a)
實驗材料核苷酸 &n
實驗概要通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原
1. 實驗目的 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理 &
FISH熒光原位雜交技術:1969年,Gall和Pardue等首次將同位素探針用于原位雜交實驗,獲得成功。1987年,染色體原位抑制雜交法的創建,使FISH技術得以迅速發展。隨后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰熒光素等非放射性物質標記探針,創立了雙色FISH熒光原位雜交技術 。1990年,
FISH熒光原位雜交技術:1969年,Gall和Pardue等首次將同位素探針用于原位雜交實驗,獲得成功。1987年,染色體原位抑制雜交法的創建,使FISH技術得以迅速發展。隨后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰熒光素等非放射性物質標記探針,創立了雙色FISH熒光原位雜交技術 。1990年,Ne
熒光原位雜交技術( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一種非放射性原位雜交方法,用特殊的熒光素標記核酸探針,在細胞或組織切片標本上進行雜交,以檢測細胞內 DNA 或 RNA 特定序列存在與否。FISH 實驗操作與用非熒光標記探針的原位雜交基本相似。在組
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年,由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增,人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現,為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
實驗概要本實驗介紹了熒光原位雜交(FISH)探針的制備原理及技術。實驗原理染色體熒光原位雜交始于傳統的細胞遺傳學和DNA技術的結合,這種結合開創了一門新的學科——分子細胞遺傳學。其基礎是Southern blot原理,以半抗原如生物素、地高辛間接標記或以熒光素直接標記的已知核酸分子為探
實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病
實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病
熒光原位雜交實驗方法,實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色
今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展! 其實相對于其
熒光原位雜交/FISH技術服務 熒光原位雜交FISH的原理 :熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)的基本原理是用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
腫瘤的個體化治療基因檢測已在臨床廣泛應用,實現腫瘤個體化用藥基因檢測標準化和規范化,是一項意義重大的緊迫任務。 為進一步提高腫瘤個體化用藥基因檢測技術的規范化水平,7月31日,國家衛生計生委個體化醫學檢測技術專家委員會,在廣泛征求意見的基礎上,制訂了《腫瘤個體化治療檢測技術指南(試行)》。
納米二次離子質譜技術(NanoSIMS)在 微生物生態學研究中的應用氮(N)、碳(C)、硫(S)等生命元素的生物地球化學循環過程主要由微生物所驅動。 耦合分析自然環境中 微生物遺傳多樣性與其代謝多樣性是當今微生物生態學研究的難點和熱點。 自然環境中的微生物多樣性極 為豐富,每噸土壤中的微生物類
PCR-SSCP法 PCR-SSCP法是在非這性聚丙烯酰胺凝膠上,短的單鏈DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同構象,一個堿基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈DNA在中性條件下會形成二級結構,這種二級結構依賴于其堿基組成,即使一個堿基的不同,也會形成不同的二
一、熒光原位雜交(FISH) 是一種簡單、敏感、而容易操作的方法,結果迅速,并能在同一標本上檢測多個不同的基因,可應用于細胞培養、染色體分裂像、冰凍切片和石蠟切片。 FISH技術是利用特異的DNA探針,標記了生物素,地高辛、或熒光素,對檢測細胞進行DNA-DNA原位雜交,并用熒光法顯示。 FISH
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗
實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構
一、DNA探針的應用 雖然一般認為DNA探針敏感度不如cRNA探針,但在病毒的檢測等領域中DNA探針仍得到廣泛的應用。 在原位雜交細胞化學的操作步驟方面與cRNA探針基本相同,所不同的是:(1)雜交時需先在高溫80~95℃短時處理,使DNA探針及細胞內靶DNA變性,解離成單鏈,迅置于冰上冷卻。然
細胞遺傳學是從細胞的角度,主要是從染色體的結構和行為來研究遺傳現象,并找出遺傳機制和遺傳規律。目前和基礎理論與臨床醫學緊密結合對于遺傳咨詢和產前診斷具有重要意義。而迅速發展的芯片技術在檢測通量、分辨率、靈敏度等方面都遠遠超過了傳統的細胞遺傳學方法。因此可以說高通量芯片技術是細胞遺傳學檢測領域的一
實驗方法原理比較基因組雜交(CGH)是一種能夠在一步全基因組篩查程序,描述G帶不能發現的細胞遺傳物質增加或減少的分子細胞遺傳學技術。CGH優于進行全染色體涂染(wcp)的常規熒光原位雜交(FISH)和多色FISH之處,是它不僅能夠識別增加的未知片段的染色體來源,而且還可將該片段定位于特定的染色體區帶
現代系統生物學有兩種革新技術:基因組學和單細胞生物學,前者具備同時監測生物體中所有基因和蛋白質的能力,后者則可以在自然微環境中跟蹤單細胞的一些特定基因。 兩種技術都很強大,但具有互補的局限性:基因組學平均了一個細胞群的異質性和空間復雜性,而單細胞技術一次只能探測幾個基因。因此,將基因組學與單細
內容:一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如
熒光原位雜交(FISH) 技術能夠快速檢測各種組織,包括新鮮和存檔標本中的染色體異常。這些技術已經為臨床細胞遺傳學和研究機構所廣泛接受。然而,這些方法卻并非常用于非細胞遺傳學診斷的病理學服務,部分是因為 FISH 圖像設備不能普遍地為負責組織學診斷的診斷醫生(外科病理學家)所用。因此,各種原位雜交探