霍華德?休斯醫學研究所(HHMI)的研究人員通過微調熒光探針的設計以及RNA固定技術,開發出一種檢測和定量腫瘤活檢樣本中microRNA分子的方法。這種新的熒光原位雜交(FISH)技術實現了腫瘤類型的鑒定。《The Journal of Clinical Investigation》雜志近日刊登了這一成果。 文章的通訊作者,霍華德?休斯醫學研究所的研究員Thomas Tuschl認為:“之前人們開發出RNA FISH方法,但它存在很多問題。我認為這篇文章是一個新的基礎,說明過去許多觀點是錯誤的,但沒有化學家進入這一領域,真正優化這些方法。” 對于microRNA的檢測,實時定量PCR等方法較為常用,但會抹去組織樣本中寶貴的空間信息。在 FISH技術中,熒光探針與特定RNA或DNA序列結合,產生熒光,可通過顯微鏡檢測。由于許多癌癥包含獨特的microRNA或microRNA組合,故這些分子的檢測也許有助......閱讀全文
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展! 其實相對于其
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
IS PCR的技術特點 (1)既具有PCR的特異性與高靈敏性,又具有原位雜交的定位準確性;(2)測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列,甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA;(3)有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析;(4)可用于正常或惡性細胞,感染或非感染細胞的鑒定
標本的制備原位PCR技術可應用于細胞懸液、細胞涂片、冰凍切片以及石蠟切片。相比較而言,以懸浮的完整細胞做原位PCR效果最好,石蠟切片效果最差。隨著技術方面的一些問題被解決,近年也有從石蠟切片中得到滿意的PCR效率的報道。效果不好的原因是多方面的,如:玻片上做PCR,熱傳導較差,熱對流不均勻,TaqD
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
DNA重組技術(或基因工程)是20世紀生物學的偉大成就,并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域,為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用,著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性(RFLP)、轉基因技術及基因芯片(DNA-chip)技術等分子生物學技術。目前這些技術已應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。 (1)核酸分子雜交技術原理和方法 1)So
根據WHO資料,全球范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的最主要途徑。以肝癌為例,腫瘤直徑<
病理學家是形態學的支持者。對他們來說,組織切片上的點點顏色能幫助你區分良性和病變的組織,為治療提供線索。當然,關鍵詞是“染色”。組織切片在光學顯微鏡下是沒有特征的,因此病理學家(研究人員)必須染色,才能看見細胞。 在許多情況下,蘇木精和曙紅(H&E)染色就足夠了,這揭示了基本的組織結構
根據WHO資料,全球范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。 10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的最主要途徑。以肝癌
一、激光顯微切割的原理激光顯微切割技術是在顯微鏡下通過切割系統對目的材料進行切割分離收集的技術。其核心技術是利用激光對顯微鏡下的生物樣本(組織,細胞簇,單細胞,染色體,染色體片斷等)進行無接觸顯微切割和分離,保證樣品無污染、精度高(切割精度可達1個微米).二、各品牌比較廠商 原理 采用激光 顯微鏡類
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性(RFLP)、轉基因技術及基因芯片(DNA-chip)技術等分子生物學技術。目前這些技術已應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。(1)核酸分子雜交技術原理和方法1)South
常用分子生物學和細胞生物學實驗技術介紹! 核酸分子雜交技術 由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定
同一個標志物可用不同方法進行檢測,如可以從血清學水平、免疫組化檢測CEA或P-gp等,也可以用FCM或RT-PCR來檢測。 血清學水平:除傳統的放射免疫分析(RIA)和酶聯免疫分析(ELISA)外,目前在國內主要有
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR
原位分子雜交和免疫組化SP法對PTEN的檢測 【摘要]目的:研究原位分子雜交和免疫組化sP法檢測PTEN mRNA及其蛋白在HCC中的表述隋況。方法:56例肝細胞肝癌組織、17例肝硬化組織手術切除標本,經40g/L福爾馬林固定,4 m厚連續切片,HE染色,病理診斷證實。結果:HCC組織中,
一、外泌體研究熱度持續攀升 外泌體(exosome)是活細胞分泌的30-200nm的囊泡,在電鏡下具有非常明顯單層膜結構,通常為茶托型或一側凹陷的半球形。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體,
一、外泌體研究熱度持續攀升 外泌體(exosome)是活細胞分泌的30-200nm的囊泡,在電鏡下具有非常明顯單層膜結構,通常為茶托型或一側凹陷的半球形。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體,
一、外泌體研究熱度持續攀升 外泌體(exosome)是活細胞分泌的30-200nm的囊泡,在電鏡下具有非常明顯單層膜結構,通常為茶托型或一側凹陷的半球形。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體,
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要
核酸原位雜交用特定標記的已知順序核酸作為探針與細胞級或組織切片中核酸進行復性雜交并對其實行檢測的方法,稱為核酸原位雜交(nucleic acid hybridization in situ)。用來檢測DNA在細胞核或染色休上的分布,與細胞內RNA進行雜交以研究該組織細胞中特定基因表達水閏;還
實驗方法:環狀DNA-seq, RNA-seq(云序生物提供以上服務)1. ecDNA是環狀結構為了了解ecDNA的結構,作者通過環狀DNA-seq(云序生物提供以上服務)方法研究了三種人類癌細胞系和來自于TCGA的臨床腫瘤樣品。通過這種方法檢測到了GBM39細胞中的圓形擴增子游
(一)熒光PCR HPV DNA檢測 HPV感染是子宮頸癌及其癌前病變(子宮頸上皮內瘤樣變)的主要病因。因此,可以將檢測HPV感染作為子宮頸癌的一種篩查手段。HPV-DNA檢測發現高度病變的敏感度為97.7%~100%,平均為98.6%,比細胞學檢查高二十多個百分點。 如果將兩者結合進行檢查,敏感
美國俄亥俄州立大學的研究人員近日開發出一種新技術,能同時觀察細胞中的基因數量和蛋白表達。此技術能夠詳細分析基因狀態以及相應蛋白表達之間的關聯,并更透徹地了解癌癥及其他復雜疾病。該成果發表在《Neuro-Oncology》上。 這種新技術稱為熒光原位基因蛋白分析(fluorescent&
目前已有許多新生物學技術應用于免疫學研究,促進了免疫學的發展,豐富了免疫學檢測的內容,使免疫學研究與相關疾病的診斷建立在基因水平,提高了檢測的敏感性和可靠性。 一、分子雜交技術 分子雜交的基本原理是根據雙鏈DNA經高溫解鏈成兩條互補的單鏈,降溫后又可恢復原來的雙鏈。兩條不同的單鏈分子可根據堿基配
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
醫學遺傳學借助于現代生物學的研究方法,在遺傳學理論指導和實驗方法廣泛采用的基礎上發展起來的。人類在遺傳學中獲得的每一新的成就都非常迅速地應用于研究人類的疾病,因而醫學遺傳學近年來得以突飛猛進。 醫學遺傳學早期受孟德爾、摩爾根經典遺傳學的指引,對遺傳病的來源及傳遞方式作了樸