酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法:20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性,現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成,可以測酶反應的初速度,其結果遠比固定時間法準確,在高濃度標本尤為明顯,但本法也受到反應時間,反應溫度,試劑等的影響,應加以注意。 (1)定時法:(兩點法) 通過測定酶反應開始后某一時間段內(t1到t2)產物或底物濃度的總變化量來求取酶反應初速度的方法。其中t1往往取反應開始的時間。 酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時間,通過加入強酸、強堿、蛋白沉淀劑等,使反應完全停止(也叫中止反應法)。加入試劑進入化學反應呈色測出底物和產物的變化。 該法最基本的一點是停止反應后才測定底物或物的變化。 優點:簡單易行,對試劑要求不高。 缺點:難保證測定結果的真實性。 難以確定反應時間段酶促反應是否處于線性期。隨著保溫時間的延續,酶變性失活加速。 (2)連續監......閱讀全文
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L=K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑.2. 開機預溫達37度.3. 選取測定程序.4. 測試:加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度.以后每隔30秒測定一次.5. 實驗結果:計算ΔA/min求出測定結果.
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L=K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑.2. 開機預溫達37度.3. 選取測定程序.4. 測試:加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度.以后每隔30秒測定一次.5. 實驗結果:計算ΔA/min求出測定結果.
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法:20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性,現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成,可以測酶反應的初速度,其結果遠比固定時間法準確,在高濃度標本尤為明顯,但本法也受到反應時間,反應溫度,試劑等的影響
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法:20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性,現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成,可以測酶反應的初速度,其結果遠比固定時間法準確,在高濃度標本尤為明顯,但本法也受到反應時間,反應溫度,試劑等的
酶活性的測定方法
一般采用測定酶促反應初速度的方法來測定活力,因為此時干擾因素較少,速度保持恒定。反應速度的單位是濃度/單位時間,可用底物減少或產物增加的量來表示。因為產物濃度從無到有,變化較大,而底物往往過量,其變化不易測準,所以多用產物來測定
酶活性測定的方式
酶促反應速度的測定可采用兩種方式: 一、測定完成一定量反應所需的時間; 二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法,后者稱為動力學法。 終點法 該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據反應進行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時間長短來估計酶的活力。 其
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法:20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性,現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成,可以測酶反應的初速度,其結果遠比固定時間法準確,在高濃度標本尤為明顯,但本法也受到反應時間,反應溫度,試劑等的影
酶活性的測定實驗
連續性檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示,或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量
酶活性的測定實驗
酶活性的測定可應用于:(1)酶動力學的研究;(2)酶抑制的研究。實驗方法原理1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示,或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量的量度,取決于指定的條件。SI單位是katal,1 katal = 1 mol /s,更實際
單胺氧化酶活性測定
實驗材料 大鼠試劑、試劑盒 磷酸鈉緩沖液蒸餾水鹽酸苯乙胺甲苯5-羥色胺雙草酸鹽β-乙基-苯乙胺鹽酸鹽苯-醋酸乙酯閃爍液儀器、耗材 制冰機水浴鍋試管試管架計數瓶離心機離心管移液槍漩渦振蕩儀
脂肪酶活性測定方法
方法:1、粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸餾水溶解并定容至100 mL, 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。2、實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物,以酶用量、水解溫度、反應時間為因素,通過酸價的測定選定其水解
脂肪酶的活性測定
方法:⒈粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸餾水溶解并定容至100 mL, 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物,以酶用量、水解溫度、反應時間為因素,通過酸價的測定選定其水解的最
酶活性測定方法是什么
1.酶活性測定方法 (1)按反應時間分類法:20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性,現多已不用。20世紀50年代中期開始采用連續監測法。這種方法在自動生化分析儀上完成,可以測酶反應的初速度,其結果比固定時間法準確,在高濃度標本尤為明顯,但本法也受
淀粉酶活性的測定
一、原理 淀粉酶(amylase)包括幾種催化特點不同的成員,其中α-淀粉酶隨機地作用于淀粉的非還原端,生成麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉漿的粘度下降,因此又稱為液化酶;β-淀粉酶每次從淀粉的非還端切下一分子麥芽糖,又被稱為糖化酶;葡萄糖淀粉酶則從淀粉的非還原端每次切下一個葡萄糖。
植物組織ATP酶活性測定
一、原理 ATP酶(adenosinetriphosphatase)可催化ATP水解生成ADP及無機磷的反應,這一反應放出大量能量,以供生物體進行各需能生命過程。它存在于生物細胞的多個部位,比如細胞質膜上,葉綠體 ?類囊體膜上,對整個生命的維持有著重要的作用。在生物學研究中,常通過測定酶促反應
脂肪酶的活性測定
方法:⒈粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸餾水溶解并定容至100 mL, 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物,以酶用量、水解溫度、反應時間為因素,通過酸價的測定選定其水解的最
亞硝酸還原酶的酶活性測定
NiRs是胞內酶,其氧化還原反應過程中需要供體電子,且大多需要在厭氧條件下進行。因此體外檢測亞硝酸還原酶時需要在密閉無氧且有電子供體的情況下才能進行檢測。電子供體有甲基紫精、連二亞硫酸鈉和硫代硫酸鈉等 。
胸腔積液檢查的酶活性測定
1.腺苷脫氨酶(adenosine deaminase, ADA):在紅細胞和T細胞中ADA含量最豐富,結核性胸膜炎(Tuberculous Pleural Effusion,TPE)時,T細胞活性增強,故胸水ADA多>45 U/L,有助于區別結核性或癌性胸水。我們就此曾進行薈萃分析[1],旨在
豆粕中尿素酶活性的測定
實驗材料 大豆 試劑、試劑盒 尿素緩沖溶液 鹽酸 氫氧化鈉 蒸餾水
豆粕中尿素酶活性的測定
一、實驗目的掌握測定尿素酶活性的各種方法的基本原理及方法步驟。?二、實驗原理將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解產生氨的反應。用過量的鹽酸溶液中和所產生的氨,再用氫氧化標準溶液回滴。?三、實驗設備1、樣品篩:孔徑200μm;2、酸度計:精度0.02pH
酶活性測定方法是什么呢?
(1)按反應時間分類法 1)定時法:(兩點法) 通過測定酶反應開始后某一時間段內(t1到t2)產物或底物濃度的總變化量來求取酶反應初速度的方法。其中t1往往取反應開始的時間。 2)連續監測法:(動力學法或速率法、連續反應法)酶反應過程中,用儀器監測某一反應產物或底物濃度隨時間的變化所發生的改
硝酸還原酶活性的測定
一、原理 硝酸還原酶是植物 ?氮素作用中的關鍵性酶,與作物吸收和利用N肥有關的不同品種,年齡、器官組織以及環境條件對硝酸還原活性都有影響,硝酸還原酶作用于NO3使還原為NO2 NO3-+NADH+H→NO2- +NAD+H2O 產生的NO2- 可以從組織內滲到外界溶液中,并積累在溶液中因此測定反應溶
淀粉酶活性的測定實驗
實驗方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化,通常提取液同時有兩種淀粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15分鐘以鈍化β-淀粉酶,便可測定
淀粉酶活性的測定實驗
實驗方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化,通常提取液同時有兩種淀粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15分鐘以鈍化β-淀粉酶,便可測
脯氨酰異構酶活性測定方法
脯氨酰異構酶活性首先是使用基于糜蛋白酶的測定法發現的。僅當脯氨酸肽鍵處于反式狀態時,蛋白水解酶糜蛋白酶對四殘基肽Ala-Ala-Pro-Phe具有非常高的底物特異性。將胰凝乳蛋白酶添加到含有具有該序列的報告肽的溶液中會導致約90%的肽快速裂解,而那些具有順式脯氨酸鍵的肽-在水溶液中約為10%-以受未
連續監測法測定酶活性濃度
連續監測法具有測定準確等眾多的優點,隨著科學技術的發展,自動生化儀的使用,正在逐步取代“固定時間法”。實際工作中,測酶活性濃度常用酶偶聯法。最簡單的酶偶聯反應為以下模式:A:底物B:待測酶產物(不能直接測定)C:指示酶產物(可以直接測定)Ex:待測酶Ei:指示酶如果一些酶反應找不到合適的指示酶與其直
豆粕中尿素酶活性的測定
一、實驗目的掌握測定尿素酶活性的各種方法的基本原理及方法步驟。?二、實驗原理將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解產生氨的反應。用過量的鹽酸溶液中和所產生的氨,再用氫氧化標準溶液回滴。?三、實驗設備1、樣品篩:孔徑200μm;2、酸度計:精度0.02pH
淀粉酶活性的測定實驗
? 實驗方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化,通常提取液同時有兩種淀粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加
酶活性測定法的測定方式介紹
酶活力的測定可采用兩種方式: 其一是測定完成一定量反應所需的時間,其二是測定單位時間內的酶催化的化學反應量。 終點法 該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據反應進行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時間長短來估計酶的活力。 其一個發展是采用檢測器對反應進行連
豆粕中尿素酶活性的測定_尿素酶解法
將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解產生氨的反應。用過量的鹽酸溶液中和所產生的氨,再用氫氧化標準溶液回滴。實驗材料大豆試劑、試劑盒尿素緩沖溶液鹽酸氫氧化鈉蒸餾水儀器、耗材樣品篩酸度計恒溫水浴鍋試管精密計時器粉碎機分析天平移液管一、實驗目的掌握測定尿素酶