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    冷凍保存細胞方法

    冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃(30-60 分鐘)→-20℃( 30 分鐘) → -80℃(16-18 小時或隔夜)→ 液氮罐長期儲存。冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80 ℃以下, 再放入液氮中長期儲存。注意:-20℃不可超過1 小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。......閱讀全文

    FCM對外周白細胞的免疫熒光分析

    外周血是臨床檢驗中的重要標本。FCM分析外周白細胞的主要目的是了解各種白細胞的數目與分群情況。這些數字的變化與臨床的某些疾病有一定的關系。近年來,由于多種識別白細胞膜表面抗原的單克隆抗體的發現,以及對這些單克隆抗體的直接或間接熒光標記物的出現,使得利用FCM的熒光組織化學分析獲得被測細胞的多指標的更

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    NK細胞介導的細胞溶解作用的研究

    前言自然殺傷細胞(Nature Killer Cells, NK)是骨髓衍化的淋巴細胞,其最初通過巨大的顆粒性狀被識別。NK細胞能自發殺滅多種腫瘤細胞,同時還可保護正常的細胞,從而被認為是癌癥的克星。最重要的是,不管是在胞內還是胞外,NK細胞不需要免疫接種或提前激活,就能夠自發溶解特定的腫瘤靶細胞,

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較

    ◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法   細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3

    深度完整版:CAR-T的現狀和未來

      CAR-T(T細胞嵌合抗原受體)作為一種免疫細胞治療方案,在全球范圍內吸引了包括學者、醫生、患者、投資人的大量關注。然而CAR-T具體是什么,它的背后有什么樣的故事、目前的研究狀況如何,未來又將走向何方呢?  CAR-T帶來的新曙光  自古以來,人們不斷地與癌癥進行斗爭。科學家們考古發現的木乃伊

    流式細胞技術基本原理應用和發展趨勢

    流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成

    養細胞的細胞生物學

    一、體內、外細胞的差異和分化1、差異:細胞離體后,失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態平衡的相對穩定環境中,日久天長,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發生轉化獲得不死性,變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此,培養中的細胞可視為一種

    原代細胞的培養與建系-3

    下面為美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)入庫細胞的基本要求:   (1)培養簡歷 組織來源日期、物種、組織來源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態,細胞已傳代數等。   (2)凍存液 培養基和保護劑名稱。 &

    癌癥免疫細胞治療知識:CAR-T與TCR-T的區別在哪里?

      腫瘤免疫治療,實際上分為兩大類。一種把腫瘤的特征“告訴”免疫細胞,讓它們去定位,并造成殺傷;另一種是解除腫瘤對免疫的耐受/屏蔽作用,讓免疫細胞重新認識腫瘤細胞,對腫瘤產生攻擊(一般來說,腫瘤細胞會巧妙偽裝,逃脫免疫的監視)。  第一種情況,因為要利用機體自身的免疫細胞,因此,目前多為免疫細胞治療

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-2

    二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞

    你一定不知道T細胞的這些最新功能!

      T細胞作為免疫系統中的重要組分和效應細胞,在抵抗細菌病毒等外來病原體和殺傷癌細胞等方面扮演著不可或缺的重要角色。因此本文為大家帶來近期關于T細胞的最新研究進展,與大家一些學習進步!  【1】Nat Immunol:在慢性病毒感染期間,殺傷性T細胞引發惡病質產生  DOI:10.1038/s415

    腫瘤細胞培養

    腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置,首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正

    微核實驗在染色體水平檢測DN A損傷實驗

    實驗步驟 一、材料 1. 胞質分裂阻滯微核試驗 2. 微核的著絲點檢測 (1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。 (2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 過氧化物酶

    Nauter子刊:個月增長87%、375項臨床研究、753種癌癥細胞療法!

       細胞免疫療法是癌癥治療的最新領域,在其中誕生PD-1免疫檢查點抑制劑以及CAR-T療法都在癌癥治療上取得了重大的突破。通過采集外周血中的免疫細胞進行分離體外培養,再進行基因工程修飾之后再回輸到體內的過繼性細胞免疫療法在血液瘤方面的治療效果顯著。  2016年,以CAR-T免疫細胞治療為代表的細

    【綜述】脂肪組織巨噬細胞:免疫治療肥胖的新靶點?

      一、引言  巨噬細胞廣泛分布于人體多個組織器官,它能識別外來病原體,在固有免疫、炎癥反應中發揮重要作用。1993年Hotamisligil等發現肥胖動物模型脂肪組織的腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌增加,首次將肥胖與炎癥相聯系,直到2003年Xu

    李漢杰博士等開發新型測序技術及揭示腫瘤T細胞的轉錄

      腫瘤組織中免疫細胞的組成在免疫治療中起關鍵作用,然而人類腫瘤組織中免疫細胞的異質性和分化途徑還有待研究。李漢杰博士等通過對25名黑色素瘤患者腫瘤中免疫細胞的單細胞轉錄組測序和單細胞TCR測序分析,發現大量的CD8 T細胞的轉錄組呈連續性梯度分布,跨越了從“過渡態”到“功能失調狀態”的分化途徑。相

    淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術

    1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。  制備單克隆抗體包括動物免疫

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

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    血液分析儀儀器原理和散點圖特點

    1、體積、電導和激光散射原理這是Beckman-Coulter 公司生產的血液分析儀所采用的經典分析方法,他集三種物理學檢測技術于一體,在細胞處于自然原始的狀態下對其進行多參數分析。該方法也稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法。此技術采用在標本中首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞,然后加入穩定劑來中

    嵌合抗原受體T細胞介紹

      過繼性細胞免疫治療是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟, 已在多種實體瘤和血液腫瘤的臨床治療中取得較好療效。  摘要: 過繼性細胞免疫治療(adoptive cellular immunotherapy, ACI)是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟,

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-4

    六、Caspase-3活性的檢測 Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關鍵的執行分子,它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個

    流式細胞儀實驗方法

    一、 實驗準備1.   標本制備:2.   zui小化非特異性結合: 二、凋亡1.凋亡的檢測方法:網站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、細胞因子1.激活的細胞因子2.CBA 四、血小板

    微核實驗在染色體水平檢測DNA損傷實驗(一)

    實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

    5637細胞| 5637細胞系 培養步驟

      5637細胞| 5637細胞系 培養步驟   產品名稱:5637細胞   中文名稱:人膀胱癌細胞;5637   規格:T25   供應商:上海慧穎生物科技有限公司   復蘇周期:10個工作日左右   培養步驟:   1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖

    從標準化、規模化、產業化談細胞治療

      1、什么是細胞治療?  細胞治療是指將正常或生物工程改造過的人體細胞移植或輸入患者體內,新輸入的細胞可以替代受損細胞、或者具有更強的免疫殺傷功能,從而達到治療疾病的目的。細胞治療在治療癌癥、血液病、心血管病、糖尿病、老年癡呆癥等方面顯示出越來越高的應用價值。一般來講,細胞治療包括腫瘤細胞免疫治療

    桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統

    實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成

    Transwell侵襲實驗

    第一節 概念這里想明確兩個概念,一個是Transwell,另一個是腫瘤細胞侵襲模型。1. Transwell關于Transwell這個詞該如何解釋,查了很多資料也未見準確的注解,我覺得可以這么理解吧,trans-這個詞根有轉移、轉運、穿過等意思,well有小室的意思,可以從字面上理解,這是一類有通透

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